簡要描述:MoFlo XDP超速流式細胞分選系統(tǒng)可對復(fù)雜樣本中的細胞進行鑒定、分類、定量和分離,單次可同時對其中一種到四種特定細胞進行超高速分選純化、高通量單克隆分選或細胞芯片制備。分選后的細胞能直接用于培養(yǎng)、移植、核酸提取、單細胞PCR擴增或原位雜交等,可進一步進行細胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同細胞之間的差異化研究。硬件中樣本細胞丟棄的比例低于5%,保證樣本中目標細胞的高回收率,特別適用于干細胞等極
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MoFlo XDP超速流式細胞分選系統(tǒng)可對復(fù)雜樣本中的細胞進行鑒定、分類、定量和分離,單次可同時對其中一種到四種特定細胞進行超高速分選純化、高通量單克隆分選或細胞芯片制備。分選后的細胞能直接用于培養(yǎng)、移植、核酸提取、單細胞PCR擴增或原位雜交等,可進一步進行細胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同細胞之間的差異化研究。硬件中樣本細胞丟棄的比例低于5%,保證樣本中目標細胞的高回收率,特別適用于干細胞等極低含量的細胞研究。
MoFlo XDP超速流式細胞分選系統(tǒng)可運對各種真核和原核細胞、植物細胞、微生物、浮游生物等進行檢測及分選。專為要求高產(chǎn)量、生物安全性和需要便捷的軟件分析系統(tǒng)的研究者而設(shè)計。
MoFlo:廣受全球科學家推崇的分選品牌
MoFlo XDP秉承傳奇血統(tǒng),續(xù)寫輝煌
作為當?shù)牧魇椒诌x系統(tǒng),MoFlo最早建立了流式分選的金標準,它為推動細胞分選在科學界的應(yīng)用做出了杰出貢獻,在全球科學家中獨享盛譽。MoFlo XDP作為此系統(tǒng)的最新一代,再度建立了21世紀的流式分選金標準,流式分選的新潮流。
MoFlo XDP:應(yīng)用電子系統(tǒng)和自動化軟件,造就信號計算心臟
MoFlo XDP充分利用強大的電子系統(tǒng)滿足流式分選所需的高速度、高純度、高回收率和高準確性的要求。多個高速計算能力的ADC的應(yīng)用極大加大了對熒光信號的采樣密度,其實際細胞上樣速度可以遠遠超過10萬/秒,不會遺漏任何一個細胞信號,并配備真正全自動的分選設(shè)置和穩(wěn)定系統(tǒng),使分選簡單易行并保證準確可靠。此外,MoFlo XDP專用一臺高性能服務(wù)器來處理和轉(zhuǎn)換接收到的信號,在硬件上為超高速提供了強大的支持。MoFlo XDP從“心"開始,為打造行業(yè)內(nèi)的分選流式平臺不遺余力,成為其它分選流式永遠的追趕目標。
MoFlo XDP:分選設(shè)計,真正在乎細胞
MoFlo XDP:稀有細胞和應(yīng)用的最好平臺
統(tǒng)計上正確:科學的實驗結(jié)果要求有良好的準確性和重復(fù)性。準確性可定義為流式所得到的信號是特異的,正確的,而重復(fù)性體現(xiàn)在統(tǒng)計學上,要求平行試驗的數(shù)據(jù)結(jié)果的變異系數(shù)控制在一定范圍之內(nèi)。
此表為不同比例的稀有細胞的結(jié)果在不同變異系數(shù)下要求獲取和保存的所需細胞總量。
一.稀有細胞應(yīng)用
標記CFSE后通過尾靜脈移植入受者小鼠體內(nèi),提取受者小鼠脾臟細胞進行移植細胞檢測??偣矙z測2293萬個細胞,發(fā)現(xiàn)移植細胞已經(jīng)進行6代增殖。R7,R8,R9分別為第5,第4,第3代移植細胞,含量分別在萬分之一左右。
含量約為1/10萬的CD133陽性細胞,分選后直接注射裸鼠皮下進行成瘤實驗。
二、低含量,連續(xù)表達細胞同時進行高速四路分選
三、腫瘤干細胞檢測
腫瘤干細胞通常缺乏特異性標記,含量又很低,所以很難被檢測到。腫瘤干細胞和普通腫瘤細胞相比,細胞膜含有有泵動功能的ABC等蛋白家族,是腫瘤耐藥和復(fù)發(fā)的決定性因素,因此對腫瘤干細胞的研究具有重要意義。
利用其細胞膜的泵動功能,以小分子活性染料Hoechst33342對腫瘤樣本進行平衡染色,可以檢測到因為泵出Hoechst33342而著色較少的側(cè)群細胞(SP,Side Population),此即為腫瘤干細胞。利用泵蛋白抑制劑Verapami同時染色,可以看到側(cè)群細胞比例明顯減少或全部消失,能確認SP細胞的位置。其它干細胞,如間充質(zhì)干細胞、造血干細胞、神經(jīng)干細胞、各種成體干細胞等都可以用這種方法來進行篩選。分選出SP細胞群和非SP細胞群,可以研究基因和蛋白表達差異、致病機理、藥物篩選等生命科學的重大課題。
四、染色體/精子分析分選
MoFlo/ MoFlo XDP高精度信號分辨能力(液流穩(wěn)定、激光/電子系統(tǒng)/PMT噪音低/運算速度快)和高活性收獲細胞(系統(tǒng)清潔度好)的功能在染色體和精子分選中得到表現(xiàn)。對牛精子分選進行人工授精生產(chǎn)小奶牛在畜牧業(yè)上有很大的經(jīng)濟效益,MoFlo/ MoFlo XDP是目前可以進行這個應(yīng)用的分選流式細胞儀,在國內(nèi)有30臺MoFlo在日夜運轉(zhuǎn)進行商業(yè)分選。
不同染色體之間的DNA含量差異很小,普通的DNA染料無法精確區(qū)分23對染色體。利用高功率355nm紫外激光激發(fā)的HOECHST 33258和高功率458nm激光激發(fā)的CA3分別對染色體的DNA進行染色。不同的染色體因其G-C/A-T堿基對的比例不同而被分離開,選中任何一條染色體設(shè)門后即可進行高純度分選。染色體分析分選可以應(yīng)用在高精度FISH、染色體移位、基因定位、染色體序列測定、染色體相關(guān)蛋白分析等。
MoFlo XDP超速流式細胞分選系統(tǒng)特點:
• 應(yīng)用電子系統(tǒng)和自動化軟件,造就的電子處理系統(tǒng),成就最快的信號采集率。
• 空氣中激發(fā),流式分選的金標準。
• 四路分選,多種分選模式,可用6-1536孔板收集。
• 多種噴嘴規(guī)格設(shè)計保證細胞活性,真正在乎細胞。
• 稀有細胞的最好平臺,干細胞研究的得力助手。
MoFlo XDP超速流式分選系統(tǒng)細胞分析技術(shù)參數(shù):
• 獲取速度能力: >100,000細胞/秒 (在任何數(shù)量熒光和補償下)。
• 分選速度能力: >70,000細胞/秒 (在任何數(shù)量熒光和補償下)。
• 分選純度: >99% (任何速度下)。
• 分選通路: 4路,可0.2 – 50ml離心管接收。
• 克隆分選: 6 – 1536微孔板,玻片或客戶任意規(guī)格矩陣,同一孔板和玻片可多路分選不同的細胞。
• 回收率: 100%泊松分布。
• 熒光靈敏度:FITC<100 MESF,PE<50 MESF。
• 液滴震蕩頻率: 200kHz (最高20萬顆液滴/秒)。
• 信號處理器(ADC)處理速度: 100MHz (0.01µsec取樣頻率)。
• 信號處理器(ADC): 2。
• 信號脈沖精度: 32bit (232,即4,294,967,296道)。
• 熒光線形范圍: 5個對數(shù)閾。
• 單次獲取和儲存的細胞信息量: 10億細胞。
• 信號數(shù)量: 2個散射光,可達21個熒光。
• 信號類型: 每個熒光可同時收集5種信號 (Height, Width, Area, Log Height, Log Area)。
• 激光激發(fā)線路: 3條,每條可實現(xiàn)3根激光共線(選配激光共線器)。
• 激光配置(可選): 488nm,200mW固體;405nm,50mW固體;
* 635nm,25mW二極管;355nm,100mW固體紫外;
* 6640nm,100mW固體;561nm,100mW固體;
* 6532nm,200mW固體;460nm,500mW固體;
* 6各種規(guī)格Coherent水冷激光和其他客戶激光器。
• 濾光片系統(tǒng): 標準套裝和Hoechst, DAPI, INDO, APC/APC-Cy7,可選裝BSLI級或II級安全柜。
• 噴嘴種類: 8種,50µm - 200µm。
• 最小分辨顆粒大?。?<0.2µm。
• 系統(tǒng)壓力: 4 – 100PSI。
• 軟件: Summit Software version 5.2或以上,開放安裝。
• 補償方法: 21 X 21全矩陣自動補償,離線補償,雙放大坐標顯示。
• 操作系統(tǒng): MicrosoftTMWindowsTM XP Professional。
• 工作平臺: NI服務(wù)器和Dell高性能工作站。
MoFlo XDP的主要用途:對復(fù)雜樣本中的細胞進行鑒定、分類、定量和分離,單次可同時對其中一種到四種特定細胞進行超高速分選純化、高通量克隆分配或細胞芯片制備。分選后的細胞能直接用于培養(yǎng)、移植、核酸提取、單細胞PCR擴增或原位雜交等,可進一步進行細胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同細胞之間的差異化研究。適用于各種真核和原核細胞、植物細胞、微生物、浮游生物等。